การทดสอบ PCR (ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส) เป็นเทคโนโลยีหลักในการวินิจฉัยระดับโมเลกุล การกำหนดมาตรฐานของกระบวนการบรรจุภัณฑ์และการทดสอบส่งผลโดยตรงต่อความแม่นยำและความปลอดภัยทางชีวภาพของผลลัพธ์ บทความนี้ให้มุมมองอย่างมืออาชีพเกี่ยวกับจุดควบคุมคุณภาพที่สำคัญตลอดกระบวนการทดสอบ PCR
การรับตัวอย่างและการปรับสภาพเป็นขั้นตอนแรกในกระบวนการ ห้องปฏิบัติการจะต้องตรวจสอบการระบุตัวอย่างเงื่อนไขการขนส่งและเวลาในการจัดเก็บอย่างเคร่งครัดเพื่อให้แน่ใจว่ามีความสมบูรณ์ของตัวอย่าง เมื่อใบเสร็จรับเงินตัวอย่างจะต้องมีหมายเลขและลงทะเบียนในตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพและผ่านขั้นตอนการประมวลผลล่วงหน้า - เช่น lysis และการสกัดกรดนิวคลีอิกตามประเภทการทดสอบ จำเป็นต้องมีระบบการตรวจสอบบุคคล - สองระบบในระหว่างขั้นตอนนี้เพื่อป้องกันการปนเปื้อนข้าม -
การเตรียมระบบปฏิกิริยา PCR จะต้องดำเนินการภายในม้านั่งที่สะอาด ผู้ประกอบการจะต้องสวมใส่อุปกรณ์ป้องกันระดับ 3 และใช้ nuclease - วัสดุสิ้นเปลืองฟรี การเตรียมรีเอเจนต์เป็นไปตามหลักการ "เวิร์กโฟลว์ทิศทางเดียว" ย้ายจากพื้นที่เตรียมน้ำยาไปยังพื้นที่ประมวลผลตัวอย่างและจากนั้นไปยังพื้นที่ขยาย การควบคุมเชิงลบการควบคุมเชิงบวกและการควบคุมภายในจะต้องรวมอยู่ในแต่ละชุดปฏิกิริยาเพื่อตรวจสอบความถูกต้องของการทดลอง
ในระหว่างขั้นตอนการขยายและการทดสอบเครื่องมือ PCR จะต้องเป็น pre - พารามิเตอร์การปรับเทียบและพารามิเตอร์การปั่นจักรยานอุณหภูมิที่ตรวจสอบแล้ว โดยทั่วไปขั้นตอนการตอบสนองจะมีสามขั้นตอน: denaturation (94 - 95 องศา), การหลอม (50-65 องศา) และการขยาย (72 องศา) จำนวนรอบถูกปรับตามเป้าหมายการตรวจจับ PCR ฟลูออเรสเซนต์แบบเรียลไทม์ยังต้องการการตรวจสอบเกณฑ์สัญญาณฟลูออเรสเซนต์ของช่องทางเฉพาะ
การวิเคราะห์ผลลัพธ์และการรายงานจะต้องดำเนินการโดยช่างเทคนิคที่มีคุณสมบัติ ข้อมูลดิบจะต้องได้รับการตรวจสอบโดยผู้เชี่ยวชาญอย่างน้อยสองคนเพื่อยืนยันสัณฐานวิทยาของเส้นโค้งการขยายความน่าเชื่อถือของค่า CT และการปฏิบัติตามวัสดุควบคุมคุณภาพกับมาตรฐาน รายงานขั้นสุดท้ายควรรวมถึงข้อมูลเกี่ยวกับวิธีการทดสอบพื้นฐานสำหรับการตีความผลลัพธ์และคำแถลงข้อ จำกัด การทดสอบ
กระบวนการทั้งหมดปฏิบัติตาม ISO 15189 และข้อกำหนด CDC ที่เกี่ยวข้องอย่างเคร่งครัด มีการรับประกันสามระบบการตรวจสอบสิ่งแวดล้อมการบำรุงรักษาอุปกรณ์และการฝึกอบรมบุคลากรเพื่อให้แน่ใจว่าความน่าเชื่อถือและการตรวจสอบย้อนกลับของการทดสอบ PCR